CRISPR作为一项新兴的基因编辑技术，自发现以来，因其简单经济、特异性高的优势在许多领域得到广泛的应用。CRISPR/Cas9是通过人工设计的 sgRNA来识别目的基因组序列，并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA双链，已经广泛应用于拮抗DNA病毒和逆转录病毒研究和应用中。随后研究人员鉴定发现了Cas13a具有RNA介导的RNA酶切活性，后续研究发现CRISPR/Cas13a能够在哺乳动物细胞中“工作”，即特异性地下调内源性和报告RNAs的水平。以往研究对于Cas13a抑制某些植物RNA病毒已有报道，但是Cas13a是否在哺乳动物细胞内抑制人类病毒的研究未见报道。

郭斐课题组在详细研究利用CRISPR/Cas9的DNA剪切活性抑制HIV复制周期中的具体作用的基础上（Hum Gene Ther. 2018），继续探讨研究了CRISPR/Cas13a靶向HIV RNA，抑制HIV复制的作用机制。研究结果题为CRISPR/Cas13a inhibits HIV-1 infection的论文于2020年6月发表在Molecular Therapy - Nucleic Acids杂志，，论文中利用来自Leptotrichia buccalis的LbuCas13a，针对HIV保守序列设计了一系列crRNA，结果证实了LbuCas13a具有抑制HIV在细胞体内复制的功能，LbuCas13a发挥抗病毒作用在HIV生活周期的各个阶段，其不仅可以直接剪切侵入的HIV基因组RNA，还可以对HIV转录的mRNA和新生成的基因组RNA进行剪切。这些研究结果为阻止HIV感染提出新的思路，为HIV感染疾病的预防和治疗提供重要研究参考。研究结果证实了Cas13a在哺乳动物细胞中能够对病毒基因组RNA和病毒转录mRNA进行剪切，有望继续扩大CRISPR/Cas13a的应用范围。

图. CRISPR/Cas13a作用于HIV生活周期各个步骤

以上研究工作得到了国家科技重大专项、国家重点研发计划和中国医学科学院医学与健康科技创新工程等项目的资助。